　物語は、地下組織の幹部である仲村トオル演じる「組長・橘四郎」と川口春奈演じる「女幹部・桜井さくら」が率いる組織「荒野連合」が舞台となります。しかし、彼らは正義を守るロードストライダーと戦い、壮絶な戦いを繰り広げています。

ロードストライダーのリーダーはMEGUMI演じる「イエローストライダー・彩音」で、出川哲朗演じる「グリーンストライダー・健太」と日村勇紀演じる「ブルーストライダー・翼」がそれぞれサポート役となっています。また、藤田まこと演じる「科学者・百地智也」と松田優作演じる「情報屋・麻生俊介」も協力し、バイク戦隊ロードストライダーを支えます。

彼らは、地下組織の策略によって武器の開発を進めており、ロードストライダーたちが彼らの手中に落ちないよう、数々の罠をはってきます。しかし、ロードストライダーたちは、彼らの暗躍を探っていくうちに、荒野連合が起こす破壊行為の背後にある真実をつかみます。

物語はロードレース、バイク、バトルシーンの数々が繰り広げられる特撮作品となっています。地下組織と正義の戦いという社会的な問題がテーマであり、バイクを通しての自由と愛といった人間ドラマも展開されます。